Zymeworks Inc. hat fünf Präsentationen mit neuen Daten aus seinen präklinischen Entwicklungsprogrammen auf der Jahrestagung 2024 der American Association for Cancer Research angekündigt, die vom 5. bis 10. April 2024 in San Diego, Kalifornien, stattfindet. ZW191 ist ein gegen FR gerichtetes Antikörper-Wirkstoff-Konjugat, das sich durch einen neuartigen Antikörper und einen neuartigen Topoisomerase I-Inhibitor auszeichnet. Das überzeugende präklinische Aktivitätsprofil unterstützt die Entwicklung von ZW191 bei verschiedenen Tumorarten, einschließlich Eierstockkrebs mit hohem/mittlerem/geringem FR-Gehalt und anderen FR-exprimierenden Indikationen, einschließlich nicht-kleinzelligem Lungenkrebs, Endometriumkrebs und dreifach negativem Brustkrebs.

Ein Zulassungsantrag für ein neues Medikament oder ein entsprechendes ausländisches Äquivalent ist für 2024 geplant. Wichtige Ergebnisse: Überlegene Internalisierung, Nutzlastabgabe und Sphäroidpenetration im Vergleich zu anderen FR-gerichteten multispezifischen Antikörpern. Die bystanderaktive Nutzlast sorgt für Aktivität in Umgebungen mit heterogener FR-Expression.

Gut verträglich, mit einer höchsten nicht schwer toxischen Dosis von 60 mg/kg bei nicht-menschlichen Primaten. Die Heterogenität der Targetexpression zwischen Patienten und innerhalb des Tumors ist ein Hindernis bei der Entwicklung von ADCs, die auf ein einziges tumorassoziiertes Antigen abzielen. Während aktive Bystander-Nutzlasten die intra-tumorale Zielheterogenität abmildern, bieten bispezifische ADCs, die unabhängig voneinander auf zwei verschiedene TAAs abzielen, einen zusätzlichen Ansatz, um die mit dem Expressionsprofil eines einzelnen Zielantigens verbundenen Einschränkungen zu überwinden.

Entscheidend für diesen bispezifischen ADC-Ansatz ist jedoch die Identifizierung des optimalen bispezifischen Antikörperformats, das für die Übertragung der Nutzlast auf zwei unabhängige Tumorantigene geeignet ist. Um diese Herausforderung zu meistern, wurde ein neuartiger Design- und Screening-Ansatz für bispezifische ADCs angewandt, wobei FR und NaPi2b als beispielhaftes Zielpaar verwendet wurden, das unabhängig voneinander in verschiedenen Krebsarten exprimiert wird. Wichtige Ergebnisse: Durch den Einsatz von AzymetricTM, Biokonjugation, analytischer Massenspektrometrie und funktionellem Hochdurchsatz-Screening wurde ein Arbeitsablauf für die schnelle Generierung und Charakterisierung bispezifischer ADCs etabliert, um das optimale Format, Paratop und die Valenz zu identifizieren.

Eine Bibliothek mit 48 bispezifischen ADC-Molekülen, die FR und NaPi2b gemeinsam ansprechen, wurde schnell generiert und deckt mehrere Paratope, Antikörperformate und Wertigkeitsbereiche (1+1, 2+1, 2+2) ab. Das funktionelle Screening der Bibliothek mit mehreren Krebszelllinien, die FR und/oder NaPi2b exprimieren, ergab Schwankungen bei der Bindung, Internalisierung und Zytotoxizität, die vom Epitop, der Valenz und der Formatgeometrie abhingen. Antikörper-Wirkstoff-Konjugate sind eine wirksame Klasse von Krebstherapeutika, die aus einer Linker-Nutzlast bestehen, die mit einem monoklonalen Antikörper konjugiert ist, der auf ein TAA abzielt, um die Abgabe der zytotoxischen Nutzlast an Krebszellen zu ermöglichen.

Die derzeitigen Standard-In-vitro-Monolayer-Modelle spiegeln die Komplexität des Tumorgewebes in vivo nicht ausreichend wider, insbesondere wenn es um die Interaktion zwischen proteinbasierten Therapeutika wie Antikörpern in einer dreidimensionalen (3D) Umgebung geht. Um dieses Problem zu lösen, wurde eine Methodik entwickelt, mit der in vitro 3D-Sphäroidmodelle aus Krebszelllinien schnell, robust und einheitlich hergestellt werden können. Anschließend wurden Methoden integriert, um die Fähigkeit zur Gewebepenetration und die zytotoxische Aktivität von strukturell unterschiedlichen Antikörpern oder ADCs mit verschiedenen Nutzlastklassen zu bewerten, die auf mehrere TAAs abzielen.

Wichtige Ergebnisse: Eine leicht umsetzbare Methode zur schnellen Erzeugung von Krebszelllinien-Sphäroiden wurde etabliert und auf über 50 verschiedene immortalisierte Krebszelllinien aus mehr als 10 Gewebetypen angewandt, die unterschiedliche morphologische Merkmale mit einer Erfolgsquote von >95% aufwiesen. Es wurden In-vitro-Assays entwickelt, um die Penetrationsfähigkeit von Sphäroiden und die zytotoxische 3D-Aktivität von multispezifischen Antikörpern und ADCs zu bewerten, so dass verschiedene Antikörperformate und Nutzlastklassen untersucht werden können. Diese 3D-Modelle und Assays dienen als wertvolle funktionelle Werkzeuge, die eine bessere Übersetzung zwischen In-vitro- und In-vivo-Aktivität ermöglichen und die Charakterisierung von therapeutischen ADC-Kandidaten und deren Weiterentwicklung in der Pipeline unterstützen.

Geringe T-Zell-Infiltration und T-Zell-Anergie sind Herausforderungen bei der Behandlung von soliden Tumoren mit konventionellen CD3- 1-bindenden bispezifischen T-Zell-Engagern. Durch die Optimierung von "Signal 1" (CD3) und "Signal 2" im Rahmen eines einzigen Moleküls haben co-stimulatorische trispezifische TCEs das Potenzial, die therapeutische Reaktion über das hinaus zu steigern, was mit konventionellen CD3-basierten TCEs erreicht werden kann, indem sie die T-Zell-Proliferation bei Patienten mit schlecht infiltrierten Tumoren stimulieren und eine dauerhaftere Anti-Tumor-Kontrolle durch verstärkte T-Zell-Aktivierung ermöglichen. Wichtige Ergebnisse: Im Vergleich zu anderen bispezifischen TCEs vermittelt das führende CLDN18.2 TriTCE Co-Stim-Molekül eine verstärkte T-Zell-vermittelte Abtötung von Tumorzellen bei niedrigen E:T-Verhältnissen, zeigt eine anhaltende T-Zell-vermittelte Aktivität in seriellen Challenge-Assays und unterstützt eine überlegene Antitumoraktivität in humanisierten Modellen von Magenkrebs.

Das Design von TriTCE Co-stim erleichtert die obligate cis-T-Zellbindung und Aktivierung von CD28, die die gleichzeitige Einbindung von CD3 erfordert, wobei bei der Inkubation mit mononukleären Zellen aus menschlichem peripheren Blut keine nachweisbaren Zytokinspiegel beobachtet werden, wenn kein Tumorziel vorliegt. CLDN18.2 TriTCE Co-stim wurde in nicht-menschlichen Primaten bei wiederholter Verabreichung gut vertragen, wobei nur minimale periphere Zytokin-Erhöhungen und keine histopathologischen Veränderungen beobachtet wurden. 2 Das kleinzellige Bronchialkarzinom (SCLC) ist ein aggressiver neuroendokriner Krebs mit einer schlechten Prognose und einem hohen ungedeckten medizinischen Bedarf.

DLL3 ist ein therapeutisches Ziel, das in SCLC und anderen neuroendokrinen Tumoren selektiv exprimiert wird. Bispezifische TCEs, die auf DLL3 abzielen, sind in die Klinik gekommen und haben bei SCLC-Patienten eine vielversprechende Anti-Tumor-Aktivität gezeigt3,4. SCLC ist jedoch häufig durch eine immunsuppressive Mikroumgebung und eine schlechte T-Zell-Infiltration gekennzeichnet, was die klinische Aktivität von CD3-Engagern einschränken kann. DLL3 TriTCE Co-Stim ist ein TriTCE, das CD3 und CD28 optimal anspricht, um zytotoxische T-Zell-Reaktionen auf DLL3-exprimierende Tumorzellen umzulenken und zu verstärken und gleichzeitig das gewünschte Sicherheitsprofil zu erhalten.

Dieser Ansatz hat das Potenzial, die Ergebnisse für Patienten zu verbessern, insbesondere für Patienten mit schwach infiltrierten Tumoren, indem er die Tiefe und Dauerhaftigkeit der Reaktion erhöht. Unter Verwendung der TriTCE Co-Stim-Plattform von Zymeworks in Kombination mit seinen AzymetricTM- und EFECTTM-Technologien hat das Unternehmen ein Panel von DLL3 TriTCE Co-Stim-Antikörperformaten erstellt und mehrere Formate, Geometrien und Paratop-Affinitäten evaluiert, was eine Optimierung der Selektivität und Aktivität ermöglichte, um einen erweiterten therapeutischen Index mit verbesserter Anti-Tumor-Aktivität zu fördern. Wichtige Ergebnisse: Induziert eine höhere In-vitro-Zytotoxizität und verbessert die Proliferation und das Überleben von T-Zellen im Vergleich zu bispezifischen TCEs.

Zeigt keine Quervernetzung von T-Zellen und weist eine obligate cis-T-Zellbindung von CD28 auf, die eine gleichzeitige Bindung von CD3 erfordert. Vermittelt eine verbesserte In-vivo-Tumorregression in einem etablierten humanisierten SCLC-Xenograft-Modell im Vergleich zu einem klinischen Benchmark-TCE.